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本实验选择 6 头优秀西门塔尔母牛进行反复超排,第一次超排超排结果列于表 2 。由表 2 可见,超排 4 ~ 7 岁母牛( 07106 、 07112 、 07136 、 07140 、 07142 )比较获得的胚胎数,差异不显著( P>0.05 );而超排 4-7 岁母牛与超排 9 岁母牛( 07119 )获得的胚胎数比较,差异较显著( P<0.05 )。
表 2 西门塔尔母牛第 1 次超排处理反应
单位:枚
母牛耳号 母牛年龄 获胚总数 可用胚胎 退化胚胎 未受精卵 07106 4 20 13 5 2 07112 5 15 10 3 2 07119 9 9 6 2 1 07136 7 12 7 5 0 07140 7 11 8 2 1 07142 6 16 5 1 0 合计 73 49 18 6
2.2 西门塔尔牛第二次超排超排结果与分析
间隔 30d ,采用同样的超排处理方案,本实验对这批西门塔尔牛
表 3 西门塔尔母牛第 2 次超排结果与反应 单位:枚
母牛耳号 母牛年龄 获胚总数 可用胚胎 退化胚胎 未受精卵 07106 4 18 11 4 3 07112 5 13 8 5 0 07119 9 11 7 2 2 07136 7 10 7 3 0 07140 7 12 9 1 2 07142 6 5 3 0 2 合计 69 45 15 9
表 4 西门塔尔母牛 2 次超排结果与反应的比较 %
胚胎情况 母牛处理 处理 母牛耳号 07106 07112 07119 07136 07140 07142 胚胎可用率 第一次冲胚 65.0a 66.7a 66.7a 58.3a 72.7a 83.3a 第二次冲胚 61.1a 61.5a 63.6a 70.0b 75.0a 60.0b 胚胎退化率 第一次冲胚 25.0c 20.0c 22.2c 41.7c 18.2c 16.7c 第二次冲胚 22.2c 38.5d 18.2c 30.0d 8.3d 0d 未受精率 第一次冲胚 10.0e 13.3e 11.1e 0e 9.1e 0e 第二次冲胚 16.7f 0f 18.2f 0e 16.7f 40.0f
注:上标不相同为差异显著 P<0.05 。
相比(表 4 ),反复超排的西门塔尔母牛,两次超排结果的胚胎可用率差异不显著( P>0.05 ),在这 6 头牛中, 07136 和 07142 牛胚胎可用率与前一次超排在结果上差异显著( P<0.05 ), 4 头 ( 07106 、 07112 、 07119 、 07140) 与上次超排结果差异不显著( P>0.05 );而在退化胚胎率和未受精率上,两次超排的结果差异显著( P<0.05 )。
本实验发现,西门塔尔母牛反复超排,对胚胎可用率没有显著变化或者是影响比较小(表 4 ),但第二次超排后胚胎退化率明显的增加,未受精率也升高( P<0.01 )。
本实验注意到,重复超排后获胚总数略有下降( P>0.05 ),说明超排对西门塔尔母牛有一定的影响,造成这种现象的原因可能是:第一次超排后母牛的卵巢增大,黄体过多,虽然经过一个情期短时期的恢复,仍然有部分 母牛的卵巢没有完全恢复好。而且同一个体在不同时间对药品反映也会有一定差别,经过重复超排,母牛对药品的敏感度降低。
2.3 提高西门塔尔牛超数排卵率相关因素的探讨
营养状况是影响供体母牛超数排卵的重要因素之一,郭志勤等 (2001) [2] 认为,中等膘情的供体牛超数排卵处理后可获得理想的排卵数,优于其它膘情的牛,本实验的结果证实了这一点,在本实验中,供试的西门塔尔母牛营养水平处于正 平衡、体质健康,超排时膘情中等。
本实验采用综合措施以提高采胚率和可用胚率,尽量避免应激因素对反复超排结果的影响,收到较好的效果 , 如加强输精操作、输精时使用细且精致的输精器外鞘,减少子宫损伤;由输精操作熟练的技术人员输精;最后一次输精后 8 ~ 12h 用青霉素 160 万 IU 、链霉素 100 万 IU 溶液清宫等 , 这与何光中等( 2003 ) [10] 王洪宝等 (2003) [11] 吴亦芳等 (2004) [12] 刘俊平等 (2008) [13] 李树静等( 2001 ) [14] 所提出的技术措施和应用效果是一致的。
超排处理本身对母牛是一次应激,而重复超排的母牛必须要有一个时期恢复,这个时间以 50 ~ 60d 为宜。重复超排间隔时间短,供体的生殖系统与激素调节不能完全恢复,重复超排效果不稳定;间隔时间长,则影响到母牛的利用率。
本实验间隔 30d 后对西门塔尔母牛进行重复超排,获得一定的效果。限于条件,本研究仅对同一供体母牛进行了 2 次的重复超排,而连续多次重复超排的最佳时间间隔、激素处理方案等还有待于进一步探讨。
3 结论
本实验在间隔 30d 对 6 头 4 ~ 9 岁的西门塔尔母牛进行重复超排,第一次超排获得胚胎 73 枚,可用胚胎 49 枚;第二次超排获得胚胎 69 枚,可用胚胎 45 枚。母牛经过一个情期的生殖与体况的恢复,其卵巢机能恢复到超排前的状态,这样重复超排,生产优质胚胎,可以提高优秀母牛胚胎的生产数量。
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